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蛋白互作分析

蛋白互作分析

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  蛋白互作研究技術:「FRET」VS「Duolink PLA」
 
  熒光能量共振轉移 (FRET)
  檢測活體中生物大分子納米級距離和納米級距離變化的有力工具,廣泛應用于生物大分子相互作用分析、細胞生理研究、免疫分析等。
 
  原理
  當供體熒光分子的發射光譜與受體熒光分子的吸收光譜重疊,并且兩個分子的距離在 10nm 范圍以內時,就會發生一種非放射性的能量轉移,即 FRET 現象,使得供體的熒光強度比它單獨存在時要低的多(熒光猝滅),而受體發射的熒光卻大大增強(敏化熒光)。
 
 
 
  應用
  1、生物大分子結構和功能研究:細胞膜受體之間相互作用、細胞內分子之間相互作用、膜蛋白的定位修飾、檢測酶活性變化等
  核酸雜交分析
  3、免疫分析:不僅適用于小分子 (如半抗原),而且適用于大分子 (如蛋白質)。
 
  特點
  1、實驗背影低,但抗原、抗體純度要求較高;
  2、簡便的均相檢測(不需要洗板),操作簡單;
  3、實驗產物比較穩定,可用于固相分析或利用特殊的熒光顯微鏡進行單細胞分析,但需要特殊的輔助設備;
  4、應用靈活多樣檢測組合豐富,需要融合蛋白的表達5、可用于復雜環境下的分析,研究活細胞生理條件下研究蛋白質-蛋白質間相互作用。
  6、有效的作為 1.0~10.0nm 距離范圍。
 
 
 
 

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